Влияние криоконсервирования на жизнеспособность, иммунофенотип и дифференцировочные свойства мезенхимальных стромальных клеток ранних стадий органогенеза

Авторы

  • N. A. Trufanova Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • Yu. A. Petrenko Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • A. Yu. Petrenko Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Ключевые слова:

криоконсервирование, мезенхимальные стромальные клетки, жизнеспособность, иммунофенотип, дифференцировка

Аннотация

ИÑÑледовали влиÑние криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð¿ÑƒÑ‚ÐµÐ¼ медленного программного Ð·Ð°Ð¼Ð¾Ñ€Ð°Ð¶Ð¸Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð½Ð° жизнеÑпоÑобноÑÑ‚ÑŒ, иммунофенотип и дифференцировочные ÑвойÑтва мезенхимальных Ñтромальных клеток (МСК) человека ранних Ñтадий органогенеза. Показано, что поÑле криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð¿Ð¾Ð´ защитой 10%-го диметилÑульфокÑида (ДМСО), включающего замораживание Ñо ÑкороÑтью 1°С/мин до –80°С Ñ Ð¿Ð¾Ñледующим погружением в жидкий азот, ÑохранноÑÑ‚ÑŒ клеток, Ð¾Ñ†ÐµÐ½ÐµÐ½Ð½Ð°Ñ Ð¿Ð¾ окрашиванию трипановым Ñиним, ÑоÑтавлÑла 88,4 ± 1,7%. МетаболичеÑÐºÐ°Ñ Ð°ÐºÑ‚Ð¸Ð²Ð½Ð¾ÑÑ‚ÑŒ клеток, Ð¾Ñ†ÐµÐ½ÐµÐ½Ð½Ð°Ñ Ð¿Ð¾ воÑÑтановлению Alamar Blue, ÑнижалаÑÑŒ поÑле криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð½Ð° 15%. ИммунофенотипичеÑкий анализ МСК 4–12-го паÑÑажей показал, что 95% клеток как до, так и поÑле криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ ÑкÑпреÑÑировали маркеры CD29, CD44, CD73 и CD105. Содержание клеток, негативных по маркерам CD34, CD38, CD45, ÑоÑтавлÑло более 95%. ПоÑле криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ ÐœÐ¡Ðš ÑохранÑÑŽÑ‚ ÑпоÑобноÑÑ‚ÑŒ к индуцированной дифференцировке в оÑтеогенном и адипогенном направлениÑÑ…. УÑтановлено, что медленное замораживание МСК под защитой ДМСО оказывает Ñтимулирующее дейÑтвие на дифференцировку клеток.

Загрузки

Опубликован

2010-06-07

Как цитировать

Trufanova, N. A., Petrenko, Y. A., & Petrenko, A. Y. (2010). Влияние криоконсервирования на жизнеспособность, иммунофенотип и дифференцировочные свойства мезенхимальных стромальных клеток ранних стадий органогенеза. Проблемы криобиологии и криомедицины, 20(2), 135–144. извлечено от http://www.cryo.org.ua/journal/index.php/probl-cryobiol-cryomed/article/view/202

Выпуск

Раздел

Теоретическая и экспериментальная криобиология