Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека

Автор(и)

  • N. G. Skorobogatova Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків
  • V. P. Grischuk Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків
  • A. Yu. Petrenko Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків

Анотація

Вивчено вплив різних умов Ð²Ð¸Ð´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð½Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚ÐµÐºÑ‚Ð¾Ñ€Ð° ДМСО на життєздатніÑÑ‚ÑŒ Ñ– колонієутворюючу активніÑÑ‚ÑŒ нативних Ñ– кріоконÑервованих клітин ембріональної печінки (КЕП) людини 7-10 тижнів геÑтації. ВикориÑÑ‚Ð°Ð½Ð½Ñ Ñ€Ð¾Ð·Ñ‡Ð¸Ð½Ñƒ ХенкÑа Ñк Ñередовища Ð²Ñ–Ð´Ð¼Ð¸Ð²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð¿Ñ€Ð¸Ð²Ð¾Ð´Ð¸Ñ‚ÑŒ до Ð·Ð½Ð¸Ð¶ÐµÐ½Ð½Ñ Ð·Ð°Ð³Ð°Ð»ÑŒÐ½Ð¾Ñ— кількоÑÑ‚Ñ– Ñ– кількоÑÑ‚Ñ– життєздатних КЕП. Заміна NaCl на Ñахарозу знижує негативний вплив процедури Ð²Ð¸Ð´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð½Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚ÐµÐºÑ‚Ð¾Ñ€Ð°. При цьому повільне Ð²Ð²ÐµÐ´ÐµÐ½Ð½Ñ Ñахарозо-Ñольового розчину (ССР) дозволÑÑ” більше зберегти життєздатніÑÑ‚ÑŒ клітин у порівнÑнні зі швидким ÑпоÑобом відмиваннÑ. Оцінку дії етапу Ð²Ð¸Ð´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð½Ñ Ð”ÐœÐ¡Ðž проводили 2 методами Ñ„Ð°Ñ€Ð±ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ (трипановим Ñинім Ñ– бромиÑтим етидієм), враховуючи загальну кількіÑÑ‚ÑŒ клітин, життєздатніÑÑ‚ÑŒ Ñ– вихід життєздатних клітин. Результати, отримані при різних умовах Ð²Ð¸Ð´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð½Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚ÐµÐºÑ‚Ð¾Ñ€Ð°, не залежали від методу оцінки Ñ– показали, що вихід життєздатних клітин Ñ” найбільш чуттєвим параметром життєздатноÑÑ‚Ñ– кріоконÑервованих клітин. Колонієутворююча  активніÑÑ‚ÑŒ КЕП людини при культивуванні в агарі на фідері, що міÑтить лейкоцити здорових дороÑлих донорів, піÑÐ»Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾ÐºÐ¾Ð½ÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ñ– повільного Ð²Ð¸Ð´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð½Ñ Ð”ÐœÐ¡Ðž за допомогою ССР залишалаÑÑ Ð½Ð° рівні нативного контролÑ. Отримані результати Ñвідчать про те, що ССР найменше ушкоджує КЕП людини на етапі Ð²Ð¸Ð´Ð°Ð»ÐµÐ½Ð½Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾Ð¿Ñ€Ð¾Ñ‚ÐµÐºÑ‚Ð¾Ñ€Ð° ДМСО.

Downloads

Опубліковано

2002-12-25

Як цитувати

Skorobogatova, N. G., Grischuk, V. P., & Petrenko, A. Y. (2002). Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека. Проблеми кріобіології і кріомедицини, (4), 16–23. вилучено із http://www.cryo.org.ua/journal/index.php/probl-cryobiol-cryomed/article/view/984

Номер

Розділ

Теоретична та експериментальна кріобіологія