Дополнительные научные формирования

На главную страницу


Отдел криоцитологии
Научные сотрудники отдела:

Отдел был создан в апреле 1993 года. Руководит отделом: д.б.н. Бабийчук Любовь Александровна. Основным направлением научной деятельности отдела является изучение молекулярных механизмов изменений структурно-функциональных свойств ядросодержащих клеток кордовой крови, в том числе и стволовых гемопоэтических (CD34+) клеток, а также модификаций плазматической мембраны эритроцитов кордовой и донорской крови человека, которые лежат в основе криочувствительности и криорезистентности клеток, под влиянием криопротекторов различного механизма действия и низких температур. Разработка новых методов криоконсервирования ядросодержащих клеток и цельной кордовой крови.

к.б.н., ст.н.с.
Рязанцев В.В.,

к.б.н.
Землянских Н.Г.

к.б.н.
Зубов П.М.

Руководитель отдела:
доктор
биологических наук
Любовь
Александровна
Бабийчук

Исследование механизмов температурно-осмотической стабилизации эритроцитов к факторам низкотемпературного консервирования позволило установить определяющую роль в этих процессах белков цитоскелета клеток, модификация которых приводит к повышению устойчивости эритроцитов к действию факторов замораживания-отогрева при условии их холодовой экспозиции в растворах ПЭО-1500.

Показано, что направленность структурной модификации плазматических мембран и белков цитоскелета клеток определяется влиянием температуры и уровнем дегидратации под действием непроникающего криопротектора ПЭО-1500 на системы, регулирующие их структурно-функциональное состояние. Это связано с изменениями концентрации внутриклеточного Са2+ и уровня фосфорилирования белков [1].

В результате проведенного изучения механизмов стабилизации клеток к действию непроникающего криопротектора и низких температур обоснованы новые подходы для направленной модификации структурно-функционального состояния клеток на начальных этапах перед криоконсервированием с целью повышения их устойчивости к замораживанию-отогреву [4].Эти подходы заключаются в формировании определенных температурно-осмотических условий, при которых происходит стабилизация плазматических мембран и белков цитоскелета. На основе принципа "холодовой стабилизации" разработан и защищен патентом Украины [5] безотмывочный способ криоконсервирования эритроцитов, который позволяет в значительной мере повысить их устойчивость к замораживанию-отогреву и сохранять структурно-функциональные показатели клеток на достаточно высоком уровне. Данный метод является более перспективным по сравнению с существующими и может найти широкое применение в практической медицине [6].

В настоящее время особое внимание уделяется выделению, криоконсервированию и изучению ядросодержащих (CD45+) в том числе стволовых гемопоетических (CD34+) клеток кордовой (пуповинной, плацентарной) крови человека [5, 6]. Исследование ядросодержащих клеток (CD45+) кордовой крови, в том числе и гемопоэтических (CD34+), а так же их жизнеспособность до и после криоконсервирования проводятся методом проточной цитофлуориметрии на проточном цитофлуориметре FACS Calibur фирмы Becton Dickinson (США) с использованием реагентов Becton Dickinson по международному ISHAGE протоколу.


Для изучения различных структурно-функциональных характеристик клеток применяется комплексный подход: определяется функциональное состояние мембраны, апоптоз клеток, метаболическая активность и, главное, способность гемопоэтических стволовых клеток кордовой крови к пролиферации и дифференциации. Изучается влияние криопротекторов различного механизма действия и процесса криоконсервирования на ядросодержащие клетки и эритроциты кордовой крови.

Использование комплексного подхода и современных методов изучения структурно-функционального состояния клеток на каждом этапе криоконсервирования (выделение, обработка криопротектором и после замораживания-отогрева), позволяет объективно определять уровень жизнеспособности клеток, вид повреждения и их способность к делению в зависимости от вида повреждающего фактора. Основываясь на полученных фундаментальных результатах разработаны и защищены патентами Украины новые методы выделения и криоконсервирования ядросодержащих клеток кордовой крови, в том числе и стволовых гемопоэтических клеток, которые легли в основу создания препарата «СТЕМКОРД-АУТО», внедренного в практику аутобанка кордовой крови, основанного на базе ИПКиК НАН Украины и ГП «МНЦ К и К НАН, АМН и МОЗ Украины».


Украина, 61015, Харьков, ул. Переяславская 23,
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины
Тел: +38 (057) 373-41-43,   373-38-07,   373-30-39;     Факс: +38 (057) 373-30-84
Электронная почта: cryo@online.kharkov.ua