|
Отдел криоцитологии |
Научные сотрудники отдела: |
|
Отдел был создан в апреле 1993 года. Руководит отделом: д.б.н. Бабийчук Любовь Александровна.
Основным направлением научной деятельности отдела является изучение молекулярных механизмов изменений структурно-функциональных свойств ядросодержащих клеток кордовой крови, в том числе и стволовых гемопоэтических (CD34+) клеток, а также модификаций плазматической мембраны эритроцитов кордовой и донорской крови человека, которые лежат в основе криочувствительности и криорезистентности клеток, под влиянием криопротекторов различного механизма действия и низких температур. Разработка новых методов криоконсервирования ядросодержащих клеток и цельной кордовой крови.
|
к.б.н., ст.н.с. Рязанцев В.В.,
к.б.н. Землянских Н.Г.
к.б.н. Зубов П.М.
|
доктор биологических наук Любовь Александровна Бабийчук |
Исследование механизмов температурно-осмотической стабилизации эритроцитов к факторам низкотемпературного консервирования позволило установить определяющую роль в этих процессах белков цитоскелета клеток, модификация которых приводит к повышению устойчивости эритроцитов к действию факторов замораживания-отогрева при условии их холодовой экспозиции в растворах ПЭО-1500.
Показано, что направленность структурной модификации плазматических мембран и белков цитоскелета клеток определяется влиянием температуры и уровнем дегидратации под действием непроникающего криопротектора ПЭО-1500 на системы, регулирующие их структурно-функциональное состояние. Это связано с изменениями концентрации внутриклеточного Са2+ и уровня фосфорилирования белков [1].
В результате проведенного изучения механизмов стабилизации клеток к действию непроникающего криопротектора и низких температур обоснованы новые подходы для направленной модификации структурно-функционального состояния клеток на начальных этапах перед криоконсервированием с целью повышения их устойчивости к замораживанию-отогреву [4].Эти подходы заключаются в формировании определенных температурно-осмотических условий, при которых происходит стабилизация плазматических мембран и белков цитоскелета. На основе принципа "холодовой стабилизации" разработан и защищен патентом Украины [5] безотмывочный способ криоконсервирования эритроцитов, который позволяет в значительной мере повысить их устойчивость к замораживанию-отогреву и сохранять структурно-функциональные показатели клеток на достаточно высоком уровне. Данный метод является более перспективным по сравнению с существующими и может найти широкое применение в практической медицине [6].
В настоящее время особое внимание уделяется выделению, криоконсервированию и изучению ядросодержащих (CD45+) в том числе стволовых гемопоетических (CD34+) клеток кордовой (пуповинной, плацентарной) крови человека [5, 6]. Исследование ядросодержащих клеток (CD45+) кордовой крови, в том числе и гемопоэтических (CD34+), а так же их жизнеспособность до и после криоконсервирования проводятся методом проточной цитофлуориметрии на проточном цитофлуориметре FACS Calibur фирмы Becton Dickinson (США) с использованием реагентов Becton Dickinson по международному ISHAGE протоколу.
|
|
Для изучения различных структурно-функциональных характеристик клеток применяется комплексный подход: определяется функциональное состояние мембраны, апоптоз клеток, метаболическая активность и, главное, способность гемопоэтических стволовых клеток кордовой крови к пролиферации и дифференциации. Изучается влияние криопротекторов различного механизма действия и процесса криоконсервирования на ядросодержащие клетки и эритроциты кордовой крови.
Использование комплексного подхода и современных методов изучения структурно-функционального состояния клеток на каждом этапе криоконсервирования (выделение, обработка криопротектором и после замораживания-отогрева), позволяет объективно определять уровень жизнеспособности клеток, вид повреждения и их способность к делению в зависимости от вида повреждающего фактора. Основываясь на полученных фундаментальных результатах разработаны и защищены патентами Украины новые методы выделения и криоконсервирования ядросодержащих клеток кордовой крови, в том числе и стволовых гемопоэтических клеток, которые легли в основу создания препарата «СТЕМКОРД-АУТО», внедренного в практику аутобанка кордовой крови, основанного на базе ИПКиК НАН Украины и ГП «МНЦ К и К НАН, АМН и МОЗ Украины».
|
Украина, 61015, Харьков, ул. Переяславская 23,
Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины
Тел: +38 (057) 373-41-43, 373-38-07, 373-30-39; Факс: +38 (057) 373-30-84
Электронная почта: cryo@online.kharkov.ua
|
|